|
نوع الوثيقة |
: |
رسالة جامعية |
|
عنوان الوثيقة |
: |
البيئات المتطرفة في المملكة العربية السعودية كمصادر لأكتينوميسيتات جديدة ذات أنشطة مضادة للميكروبات Extreme Habitats of Saudi Arabia as Sources of Novel Actinomycetes with Antimicrobial Activities |
|
الموضوع |
: |
كلية العلوم |
|
لغة الوثيقة |
: |
العربية |
|
المستخلص |
: |
في الآونة الأخيرة، أصبحت هناك حاجة ملحة لاكتشاف عقاقير حديثة نتيجة ظهور كائنات حية دقيقة مسببة للأمراض المعدية ومقاومة للأدوية. بالإضافة إلى ذلك، هناك احتياج مستمر للإنزيمات ذات الخصائص الفعالة في مجال الصناعة. اتجهت الدراسات البحثية إلى عزل بكتيريا الأكتينوميسيتات من البيئات المتطرفة لاكتشاف مركبات طبيعية نشطة بيولوجيًا وتجنب إعادة عزل السلالات المعروفة. لذلك هدفت الدراسة الحالية إلى عزل الأكتينوميسيتات من أربع بيئات متطرفة مختلفة في المملكة العربية السعودية وهي: المنطقة القاحلة، والكهوف، والبيئة البحرية، والينابيع الحارة. اعتمادًا على الشكل الظاهري المميز للأكتينوميسيتات، تم الحصول على 54 عزلة مختلفة باستخدام بيئة آجار نترات النشا. اشتملت عزلات الأكتينوميسيتات على 22عزلة من تربة المنطقة القاحلة، و12عزلة من تربة الكهوف، و7عزلات من عينات البحر، و13عزلة تم الحصول عليها من تربة ومياه الينابيع الحارة. تمت دراسة بعض الصفات الظاهرية والفسيولوجية والبيوكيميائية لجميع العزلات. ولوحظ أن العزلات ML52،ML53، ML54التي تم الحصول عليها من الرواسب البحرية مقاومة لمجموعة واسعة من المضادات الحيوية. كما تم تعريف جميع العزلات باستخدام تحليل 16S rRNA. وأوضحت النتائج أن معظم العزلات (90,75٪) انتمت إلى أنواع تابعة للجنس Streptomyces spp.، ولقد لوحظ أن Streptomyces mutabilis هو النوع السائد بنسبة 16,67٪ حيث تم عزله من جميع البيئات المتطرفة الأربعة. وتم تعريف عزلة واحدة تم الحصول عليها من المنطقة القاحلة بانتمائها إلى الجنس Lentzea، ووجد تشابه بين هذه العزلة والنوع Lentzea albidocapillata بنسبة 99٪، كما تم عزل سلالتين من تربة الكهف تابعة لجنس نادرAmycolatopsis . ولم يتم الوصول إلى تعريف للعزلتينAL3 و.AL7 بالإضافة إلى تعريف عزلات منطقة الينابيع الساخنة باستخـدام 16S rRNA، تم أيضًا استخدام بعض برامج المعلوماتية الحيوية bioinformatics في تعريف هذه العزلات. كما تمت دراسة مقدرة جميع العزلات المختارة على إنتاج بعض الإنـزيمات المهمة وإنتاج المضادات الحيوية. فيما يتعلق بالـكشف عن النـشاط الإنزيمي للعزلات، لوحظ أن البيئات المتطرفة الأربعة مصادر جيدة لعزل الأكتينوميسيتات المنتجة لإنـزيم الكيراتينيز، والجيلاتينيز، والكيتينيز، والليبيز. بينما كان إنـتاج إنـزيمي الأميليز والبروتيز من الأكتينوميسيتات المعزولة من المنطقة القاحلة والكهوف أفضل نـسبيًا من تلك المعزولة من منطقة الينابيع الحارة والبيئة البـحرية. خضعت جـميع العزلات لاختبار قـدرتها على إنـتاج المضاد الميكروبي بـواسطة قـياس قطر منطقة التثبيط ضد أنـواع مختارة من البـكتيريا الممرضةStaphylococcus aureus, Methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA), Enterococcus faecalis, Acinetobacter baumannii, Klebsiella oxytoca, Escherichia coli وكانت العزلات التالية: العزلة AL3 التي تـم الحصول عليها من المنطقة الجافة، والعزلـة Streptomyces CL24 المعزولة من منطقة الكهف، والعزلة Streptomyces mutabilis ML51 المعزولة من البيئة البحريـة من أكثر السلالات نشاطًا في إنـتاج المضادات الحيويـة، حـيث أظهرت هـذه العزلات نـشاط ميـكروبي ضد جـميع الأنـواع البـكتيريـة المختبرة الموجبة لصبغة جرام. وقـد سجلت العزلة AL3 أكبر منـاطق تثبيط بمقـدار 11، 13، 15 مم ضد بـكتيريا S. aureus، MRSA، E. faecalis، على التـوالي. تـم استخلاص الـمادة الـخام للعزلـة AL3 باستـخدام مذيب أسيتات الإيثيل وتـم تجفيفها تحت ضغط منخفض، وأظهر المستخلص نـشاط ملحوظ ضد البـكتيريـا المختبرة E. faecalis. كما تـم تنقية المادة الفعالة باستخدام طريـقة الـفصل الكروماتـوجـرافي.TLC-bioautography تـعتبر الأكتينوميسيتات البحريـة مصدرًا واعـدًا لاكـتشاف المضادات الحيـوية الجديدة حيث أظهرت معظم السلالات (43,71٪) نـشاط ميـكروبي ضد نـوع واحـد على الأقـل من البكتيريـا المختبـرة S. aureus, MRSA, E. faecalis, or E. coli بينما سجلت الأكتينوميسيتات الأخرى المعزولة من بيئات الكهوف والمنطقة القاحلة والينابيع الحارة أقل نسبة نشاط ميكروبي 41,67٪ و36,36٪ و 23,08٪، على التوالي. لقد لوحظ أن الأكتينوميسيتات المتواجدة في الظروف البيئية القاسية منتجة بشكل واضح للمضادات الحيوية وبعض الإنزيمات المهمة. لذلك، لا بد من الاستمرار في دراسة البيئات المتطرفة المختلفة في المملكة العربية السعودية لعزل المزيد من الأكتينوميسيتات التي تمتلك مركبات جديدة ذات أهمية بيولوجية. |
|
المشرف |
: |
أ.د ماجدة محمد علي |
|
نوع الرسالة |
: |
رسالة دكتوراه |
|
سنة النشر |
: |
1441 هـ
2020 م |
|
تاريخ الاضافة على الموقع |
: |
Saturday, June 20, 2020 |
|
الباحثون
| لينا أحمد باحمدين | Bahamdain, Lina Ahmed | باحث | دكتوراه | |
|